Desenho do estudo da diacereína em pacientes com Covid-19

Desenho do estudo Este é um estudo piloto randomizado, controlado por placebo e duplo-cego projetado para verificar se a diacereína atenua a resposta inflamatória sistêmica em pacientes hospitalizados com COVID-19. Este estudo foi analisado e aprovado pelo Comitê de Ética da Universidade Estadual de Campinas (CAAE: 50440921.6.0000.5404). População do estudo Quarenta pacientes com diagnóstico confirmado de COVID-19 serão incluídos no estudo. Os pacientes serão identificados como internados no Hospital Estadual Sumaré (Sumaré, Brasil) e no Hospital das Clínicas da Unicamp (Campinas, Brasil). Após a inscrição, os pacientes serão randomizados (n=20 por grupo) de forma 1:1 para receber diacereína 50mg ou placebo a cada 12 horas por 10 dias. Recrutamento Todos os pacientes admitidos com COVID-19 que atendam aos critérios de inclusão e exclusão serão convidados a participar do estudo. Após a leitura e assinatura do termo de consentimento informado, o paciente será alocado aleatoriamente em dois braços de tratamento. Randomização e ocultação Após a inscrição, os pacientes serão randomizados (n=20 por grupo) 1:1 para receber 50 mg de diacereína ou tratamento com placebo a cada 12 horas por 10 dias. A plataforma de captura eletrônica de dados de pesquisa (REDCap) será utilizada como sistema de randomização. Pacientes, investigadores e outros funcionários de apoio serão cegos para a terapia experimental. A droga do estudo, diacereína (Artrodar®-cápsulas 50mg) e cápsulas placebo (lactose e estearato de magnésio), serão semelhantes em tamanho e aparência para manter a cegueira. Todas as análises laboratoriais serão realizadas de forma cega ao tratamento. A identificação do medicamento em estudo só ocorrerá após o bloqueio do conjunto de dados. Intervenção do ensaio Após a randomização, os pacientes alocados no tratamento ativo receberão 1 cápsula de diacereína (Artrodar®, 50mg) por via oral a cada 12 horas por 10 dias. Os pacientes randomizados para o grupo placebo receberão 1 cápsula (lactose e estearato de magnésio) por via oral a cada 12 horas por 10 dias. Haverá um ajuste de dose da medicação do estudo (diacereína ou placebo) para 1 cápsula a cada 24 horas (diminuição da diacereína para 50 mg a cada 24 horas em vez de a cada 12 horas) em participantes que sofreram lesão renal aguda com taxa de filtração glomerular estimada <30mL/min ou necessitando de terapia de substituição renal. Se a terapia de substituição renal for necessária, o medicamento do estudo será administrado imediatamente após a diálise. Se o paciente estiver intubado, as cápsulas de diacereína ou placebo serão abertas e seu conteúdo será colocado em sachês de náilon previamente limpos e devidamente identificados. O conteúdo do sachê será dissolvido em 10 a 20ml de água destilada em seringa de 20ml no momento da administração pela enfermagem na presença de um pesquisador. A intervenção do estudo não atrasará nem afetará o manejo clínico do paciente de acordo com as políticas do centro local. Análises laboratoriais Na admissão, a primeira amostra de sangue será coletada antes da primeira dose do medicamento em estudo (Dia 0), e depois três e dez horas após a administração do medicamento. Amostras de sangue também serão coletadas no segundo (Dia 2), quinto (Dia 5) e décimo (Dia 10) dia de tratamento. Com exceção das amostras obtidas na admissão, as amostras de sangue serão coletadas após jejum de 12 horas. Imediatamente após a coleta, todas as amostras serão centrifugadas a 3.500 rpm e congeladas em nitrogênio líquido para processamento em lote único. Citocinas inflamatórias (proteína c-reativa, IL-1β, IL-6, IL-8, IL-10, IL-12p70, IFN-α2, IFN-β, IFN-γ, TNF-α, IP-10 GM-CSF ) serão medidos por imunoensaio multiplex (Bio-Plex 200®, Bio-Rad), além de outros marcadores, como medidas de troponina-T e D-dímero. Pontos finais do estudo Os pontos finais são a alteração nos níveis séricos de citocinas, troponina-T e D-dímero do Dia 0 ao Dia 5 de hospitalização e do Dia 0 ao Dia 10, bem como a área sob a curva considerando todas as medições de Do dia 0 ao dia 10. Os desfechos secundários incluem (i) tempo até a deterioração clínica definido como o tempo desde a randomização até a mortalidade ou piora da Escala de Progressão Clínica da Organização Mundial da Saúde (OMS), avaliada pelo aumento de dois pontos nessa escala; (ii) incidência cumulativa de eventos adversos; (iii) incidência cumulativa de eventos adversos graves. Biodisponibilidade da diacereína A biodisponibilidade da diacereína e seu metabólito ativo, a reína, será avaliada no soro de pacientes randomizados para tratamento com diacereína para garantir a biodisponibilidade em pacientes com COVID-19. Serão utilizadas amostras do Dia 0 e momentos: logo antes, três e dez horas após a administração do medicamento em estudo. Todos os pacientes terão essas amostras coletadas para manter o cegamento do estudo. As concentrações séricas de diacereína e reína serão determinadas por cromatografia líquida-espectrometria de massas em tandem ao final do estudo. Cálculo do tamanho da amostra Como não há dados disponíveis sobre o efeito da diacereína na resposta inflamatória em pacientes com COVID-19, o tamanho da amostra foi estabelecido empiricamente em 40 indivíduos em uma expectativa conservadora de tamanho de efeito padronizado pequeno (0,2). Portanto, decidimos realizar uma amostra piloto com 40 pacientes (n=20 por braço do estudo) com desfechos de resposta inflamatória sistêmica e segurança. A população de análise de segurança aplicada a todos os pacientes randomizados que receberam pelo menos uma dose de diacereína. A avaliação de segurança será baseada na incidência cumulativa de resultados de segurança, eventos adversos, exames físicos, sinais vitais e testes laboratoriais de segurança. O endpoint primário de segurança será o tempo entre a randomização e a primeira ocorrência. Análise Estatística As variáveis contínuas serão representadas pela mediana e pelo intervalo interquartílico associado. As variáveis categóricas serão apresentadas como frequência absoluta (n) e frequência relativa (%). Dados estatísticos resumidos (média, desvio padrão, mediana, mínimo e máximo) serão fornecidos pelo grupo de tratamento para características demográficas e basais usando um teste qui-quadrado (por exemplo, variáveis categóricas) e modelo de análise de variância unidirecional (ANOVA) com tratamento como fator (por exemplo, variáveis contínuas). Além disso, as características demográficas e basais serão comparadas entre os grupos de tratamento para a população com intenção de tratar (ITT). A significância deste teste será utilizada como avaliação inicial para a satisfação da randomização. As concentrações de citocinas pró-inflamatórias plasmáticas serão consideradas como parâmetros de eficácia. Os grupos serão comparados pelas mudanças na admissão (Dia 0) versus dias de avaliação (Dia 2, Dia 5 e Dia 10). Além disso, comparação entre as áreas sob a curva para cada um dos parâmetros do Dia 0 ao Dia 10. Variáveis contínuas com distribuição normal e não paramétrica serão comparadas por análise de covariância (ANCOVA) ou por análise de classificação de variância (RANKOVA) ajustado pelos valores da linha de base para mitigar a regressão em direção à média.